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  • 阅读: 2022/4/2 17:03:36

    细胞培养过程中容易出现各种各样的问题,精心呵护的细胞传代后怎么都不贴壁,贴壁了又会成团或成片的脱落下来,没脱落下来的偶尔还会被污染,没污染的可能又会死亡......这些问题使做细胞实验的家人们很是头疼,这次就让我们来聊聊如何解决细胞培养的问题。

    培养细胞不贴壁怎么办?

    适度消化细胞;

    注意清洗,用塑料瓶培养;

    细胞传代24小时之内,不要晃动,避免影响贴壁;

    缩短胰蛋白酶消化时间或降低胰蛋白酶浓度;

    调节最佳接种细胞浓度;

    传代接种一定要均匀铺板,避免细胞抱团生长;

    正确配制、储存消化液或培养液。

    贴壁细胞成团怎么办?

    选择细胞未长满单层时传代(即处于对数生长期);

    别等细胞长太满就收获,消化之前用生理盐水或PBS洗涤两次;

    降低铺板密度;

    若已成团,可以低俗离心把状态不好的聚团细胞去除,然后把上层液体里面的细胞转移继续培养。

    培养细胞死亡怎么办?

    检测血清、pHCO?浓度;

    检查培养箱内温度;

    取新的保存细胞种;

    检测培养液渗透压;

    换入新鲜培养液。

    培养细胞是件费心费神的事情,细胞的脆弱程度相信大家能感同身受,一不小心就会被污染。然而具体情况要看具体培养的细胞及实验环境、手法而定,希望大家的实验都能顺顺利利!

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